Оборудование для быстрой и высокочистой изоляции внеклеточных визикул/экзосом

Выделение интактных внеклеточных везикул/экзосом представляет собой серьезную проблему из-за их небольшого размера, комплексной природы биологических жидкостей, в которых они часто встречаются, и хрупкой природы этих объектов. Препаративные колонки Izon qEV позволяют изолировать высокочистые образцы интактных экзосом из различных жидкостей, включая слюну, плазму и супернатант клеточной культуры. Колонки работают на принципе эксклюзионной хроматографии и обеспечивают быстрое (<15 минут) и эффективное выделение на указанные пользователем объемы и буферы.

 

Ключевые особенности:

1. Быстро, просто и надежно.

Колонки qEV требуют минимального вмешательства пользователя, а интактные экзосомы элюируются в течение 15 минут. Воспроизводимость и надежность результатов подтверждены межлабораторными испытаниями.

2. Стандартизация и воспроизводимость.

Каждая колонка сертифицирована по стандарту ISO 13485 (медицинское оборудование), имеет сертификат качества, что делает изоляцию qEV пригодной для клинических исследований.

3. Высокочистые интактные экзосомы.

Колонки qEV позволяют получить высокочистые образцы, не влияя на структуру и функцию экзосом.

Рисунок 1.

Типичный профиль элюирования для колонки qEVoriginal с 0,5 мл плазмы; белки элюируются в более позднем объеме, чем везикулы. Концентрацию везикул измеряли с помощью qNano, а уровниконцентрацию белка определяли по поглощению при 280 нм.

Колонки qEV в большинстве случаев удаляют> 97% загрязняющих растворимых белков. Колонки совместимы с большинством физиологически релевантных буферов, что означает, что высокие выходы экзосом могут быть получены в условиях, подходящих для последующей электронной микроскопии, протеомного и РНК анализов, физических измерений и других последующих измерений.

Новый стандарт в изоляции экзосом

До появления колонок для SEC (эксклюзионная хроматоргафия), UC (ультрацентрифугирование) считался золотым стандартом для концентрации и выделения внеклеточных везикул. UC отнимает много времени и не может предоставить единообразную стандартизированную выборку. Очень высокие силы в UC, до 200000 g, нарушают интактность, разрушают и агрегируют везикулы, что, в свою очередь, может свести на нет большую часть исследований.

Более того, агрегированные белки и загрязняющие нуклеиновые кислоты присутствуют в осадке, содержащем экзосомы. Центрифугирование в градиенте плотности (DGC) направлено на улучшение чистоты экзосом, полученных из UC, но увеличивает сложность и время процедуры, а также снижает выход экзосом. Стандартизованный отбор проб в разных лабораториях невозможен ни с UC, ни с DGC.

Наборы реагентов, адаптированные для очистки экзосом, как правило состоят из полиэтиленгликоля и осаждают широкий спектр продуктов, а не только сами экзосомы. Опубликованные независимые данные показывают, что полученные таким осаждением фракции сильно загрязнены материалами, не относящимися к экзосомам, поскольку эти реагенты вызывают также соосаждение белков, липопротеинов и других биологических компонентов.

И только колонки qEV SEC предоставляют высокочистые образцы, не влияя на структуру или функцию экзосом.

Как работает технология qEV?

Колонки qEV используют принцип эксклюзионной хроматографии (SEC). В эксклюзионной хроматографии используется неподвижная фаза, состоящая из пористых частиц смолы. Молекулы, размер которых меньше диапазона изоляции (35 нм + или 70 нм +), замедляются, потому что они входят в поры неподвижной фазы. Более крупные частицы, которые не могут попасть в поры, обтекают смолу и раньше элюируются из колонки.

Выберите колонку qEV для Ваших исследований

В настоящее время на выбор предлагаются колонки 5 различных объемов, каждая из которых доступна в 2 вариантах: 35 нм + и 70 нм +.

Популярные колонки 70 нм + имеют оптимальный диапазон извлечения частиц от 70 нм до 1000 нм, в то время как более новые колонки 35 нм + имеют оптимальный диапазон извлечения от 35 нм до 350 нм.

qEV/35 нм	qEV/70 нм
·         Диапазон извлечения: 35 -350 нм ·         Более высокое извлечение экзосом размером <110 нм ·         Большее перекрытие с липопротеинами при работе с плазмой крови	·         Диапазон извлечения: 70 - 1000 нм ·         Более высокое извлечение экзосом размером> 110 нм ·         Меньшее перекрытие с липопротеинами при работе с плазмой крови

Для заказа доступны:

qEVsingle	qEVoriginal
<150 мкл Загрузка образца (рекомендуется для максимальной чистоты).	<500 мкл Загрузка образца (рекомендуется для максимальной чистоты).
Идеально подходит для клинических образцов, ОТ-ПЦР Оптимизирован для небольших образцов. Без переноса РНК (одноразовое использование). Совместим с автоматическим коллектором фракций. Одноразового использования	Идеально подходит для исследований большого объема Оригинальная и самая популярная колонка qEV. Совместим с автоматическим коллектором фракций. Многоразовая До 5 раз.

qEV2	qEV10
<2 мл Загрузка образца (рекомендуется для максимальной чистоты).	<10 мл Загрузка образца (рекомендуется для максимальной чистоты).
Идеально подходит для больших клинических образцов и подготовки к анализу РНК Включает двойной фитинг Leur Lock. Совместима с автоматическим коллектором фракций Многоразовая До 5 раз.	Идеально подходит для супернатанта клеточной культуры большого объема Включает двойной фитинг Leur Lock. Совместима с автоматическим коллектором фракций. Многоразовая До 5 раз.

qEV100

<100 мл Загрузка образца (рекомендуется для максимальной чистоты).

Идеально подходит для крупномасштабной быстрой изоляции EV Включает двойной фитинг Leur Lock. Многоразовая До 5 раз.

Дополнительно можно заказать:

qEV Набор для выделения РНК	qEV Набор для концентрации
Автоматический коллектор фракций AFC	qEV Штатив

Изоляция EV теперь может быть автоматизирована и масштабирована

Первая в мире автоматизированная интеллектуальная система изоляции экзосом уже здесь! Значительное усовершенствование платформы qEV - автоматический коллектор фракций (AFC) от Izon, позволяет быстро, точно и автоматически изолировать экзосомы. До сих пор процесс выделения экзосом был трудоемким и трудно масштабируемым. AFC автоматизирует процесс выделения, устраняя человеческую ошибку, обеспечивая высокоточную крупномасштабную стандартизируемую изоляцию экзосом.

(читать подробнее)